动物实验室
实验动物的血液采集
实验动物的血液采集
一、采血方法的选择
取血方法的选择，决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液 pH 值以及 K+、Na+、CI-离子浓度，必须采取动脉血液。
采血时要注意：
⑴采血场所有充足的光线； 室温夏季最好保持在 25～28℃，冬季15～20℃ 为宜；
⑵采血用具及采血部位一般需要进行消毒；
⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；
⑷若需抗凝，在注射器或试管内预先加入抗凝剂。
二、采血方法
（一）鼠类
1、割（剪）尾采血
当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在
2、鼠尾刺血法
大鼠用血量不多时（仅做白细胞计数或血红蛋白检查），可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集0.1～0.5ml。如果长期反复取血，应先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。
3、眼眶静脉丛采血
采血者的左手拇、食两指从背部紧握住小鼠或大鼠的颈部（大鼠采血需带上线手套），应防止动物窒息。取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持1ml 注射器或长（3～4cm）硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5～1
4、断头取血
采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大（小）鼠的颈部皮肤，并将动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2 ～ 4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。小鼠可采血约0.8～1.2ml；大鼠约5 ～10ml。
5、心脏采血
鼠类的心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次性采血，先将动物作深麻醉，打开胸腔，暴露心脏，用针头刺入心室，吸取血液。小鼠约0.5～0.6ml；大鼠约0.8～1.2ml。
6、颈动脉采血
先将动物仰卧位固定，切开颈部皮肤，分离皮下结缔组织，使颈静脉充分暴露，可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉，远心端结扎，近心端剪口将血滴入试管内。
7、腹主动脉采血
先将动物麻醉，仰卧固定在手术工作台上，从腹正中线切开皮肤腹腔，使腹主动脉暴露清楚。用注射器吸出血液，防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织，夹住动脉近心端，用尖头手术剪刀，剪断动脉，使血液喷入盛器。
8、股动（静）脉采血
先由助手握住动物，采血者左手拉直动物下肢，使静脉充盈。或者以搏动为指标，右手用注射器刺入血管。体重15～20g 小鼠采血约0.2～0.8ml，大鼠约0.4～0.6ml。
（二）狗、猫采血法
1. 后肢外侧小隐静脉和前肢内侧头静脉采血
此法最常用，且方便。后肢外侧小隐静脉在后肢胫部下1/3的外侧浅表的皮下，由前侧方向后行走。抽血前，将狗固定在狗架上或使狗侧卧，将胶皮带绑在狗股部，由助手将狗固定好。将抽血部位的毛剪去，碘酒－酒精消毒皮肤。使下肢静脉充盈，右手用连有针头的注射器迅速穿刺入静脉，左手将针固定，以适当速度抽血（以无气泡为宜）。采集前肢内侧头静脉血时，操作方法基本与上述相同。一般采血量为10～20ml。
2. 股动脉采血
本法为采取狗动脉血最常用的方法。操作也较简便。稍加以训练的狗，在清醒状态下将狗仰卧位固定于狗解剖台上。伸展后肢向外伸直，暴露腹股沟三角区动脉搏动的部位，剪去被毛，用碘酒消毒。左手中指、食指探摸股动脉跳动部位，右手持注射器，针头由动脉跳动处直接刺入血管，若刺入动脉一般可见鲜红血液流入注射器，若未见动脉血流出，还需微微转动一下针头或上下移动一下针头。有时往往刺入静脉，必须重抽之。待抽血完毕，迅速拔出针头，用干药棉压迫止血2～3分钟。
3.心脏采血
本法最好在麻醉下进行，将犬仰卧固定在手术台上，前肢向背侧方向固定，暴露胸部，将左侧第3～5肋间的被毛剪去，用碘酒-酒精消毒皮肤。采血者用左手触摸左侧3～5肋间处，选择心跳最明显处穿刺。一般选择胸骨左缘外
4. 耳缘静脉采血
本法宜取少量血液作血常规或微量酶活性检查等。有训练的狗不必绑嘴，剪去耳尖部短毛，即可见耳缘静脉，手法基本与兔相同。
5. 颈静脉
狗不需麻醉，经训练的狗不需固定，未经训练的狗应予固定、绑嘴。取侧卧位，剪去颈部被毛，用碘酒、酒精消毒皮肤。将狗颈部拉直，头尽量后仰。用左手拇指压住颈静脉入胸部位。使颈静脉怒张，右手取连有针头的注射器。针头沿血管平行方向，向远心端刺入血管。由于颈静脉在皮下易滑动，针刺时刺入要准确。取血后注意压迫止血。采用此法一次可取较多量的血。猫的采血法基本与狗相同。常采用前肢皮下头静脉、后肢的股静脉、耳缘静脉取血。需大量血液时可从颈静脉取血。方法见前述。
（三）兔采血法
1) 耳静脉采血
本法为最常用的取血法之一，常作多次反复取血用。因此，保护耳缘静脉，防止发生栓塞特别重要。将兔放入仅露出头部及两耳的固定盒中，或由助手以手扶住。选耳静脉清晰的耳朵，将耳静脉部位的毛拔去，用75%酒精局部消毒，用手指轻轻摩擦兔耳，使静脉怒张，用连有针头的注射器在耳缘静脉末端刺破血管取血，取血完毕用棉球压迫止血，此种采血法一次最多可采血5ml。
2) 耳中央动脉采血
将兔置于兔固定盒内，在兔耳的中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉，用左手固定兔耳，右手取注射器，在中央动脉的末端，沿着动脉平行向心方向刺入动脉，即可见动脉血进入针筒，取血完毕后注意止血。此法一次抽血可达15ml。但抽血时应注意，由于兔耳中央动脉容易发生痉挛性收缩，因此抽血前，必须先让兔耳充分充血，当动脉扩张，未发生痉挛性收缩之前立即进行抽血，如果等待时间过长，动脉经常会发生较长时间的痉挛性收缩。取血用的针头一般用6 号针头，不要太细。针刺部位从中央动脉末端开始。不要在近耳根部取血，因耳根部软组织较多，血管位置略深，易刺透血管造成皮下出血。
3) 心脏取血
家兔仰卧固定，在第三肋间胸骨左缘
注意事项有：
⑴动作宜迅速，以缩短在心脏内的留针时间和防止血液凝固；
⑵如针头已进入心脏但抽不出血时，应将针头稍微后退一点。
⑶在胸腔内针头不应左右摆动以防止伤及心、肺。一次可取血20～25ml。
4）后肢胫部小隐静脉取血
将兔仰卧固定于兔固定板上，或由一人将兔固定好。拔去胫部被毛，在胫部上端股部扎以橡皮管则在胫部外侧浅表皮下，可清楚见到小隐静脉。用左手两指固定好静脉,右手取带有5(1/2)号针头的注射器内皮下静脉平行方向刺入血管，抽一下针栓，如血进入注射器，表示针头已刺入血管，即可取血。一次可取2～5ml。取完后必须用棉球压迫取血部位止血，时间要略长些，因此处不易止血。如止血不妥，可造成皮下血肿，影响连续多次取血。
5）股静脉、颈静脉取血
取血前，先作股静脉和颈静脉暴露分离手术 。
⑴股静脉取血：注射器平行于血管，从股静脉下端向近心方向刺入，徐徐抽动针栓即可 取血。抽血完毕后要注意止血。股静脉较易止血，用于纱布轻压取血部位即可。若连续多次取血，取血部位宜尽量选择远心端末端。
⑵颈外静脉取血：注射器由近心端（距颈静脉分支2～3厘米处）向头侧端顺血管平行方向刺入，使注射针至颈静脉分支叉处，即可取血。此处血管较粗，很容易取血，取血量也较多，一次可取10ml 以上。取血完毕，拔出针头，用干纱布轻轻压迫取血部位。兔急性实验的静脉取血，用此法较方便。
（四）豚鼠采血法
1、耳缘剪口采血
将耳消毒后，用锐器（刀或刀片）割破耳缘，在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液，阻止血凝，则血可自切口自动流出，进入盛器。操作时，使耳充血效果较好。此法能采血0.5ml左右。
2、心脏采血
取血前应探明心脏搏动最强部位，通常在胸骨左缘的正中，选心跳最明显的部位作穿刺。其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体较小，一般可不必将动物固定在解剖台上，而可由助手握住前后肢进行采血即可。
3、股动脉采血
将动脉仰卧位固定在手术台上，剪去腹沟区的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒。切开长约2～
4、足背静脉取血
助手固定动物，将其左或右膝关节伸直提到术者面前。术者将动物背面用酒精消毒，找出足背静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿的注射针刺入静脉。采血后，用纱布或脱脂棉压迫止血。反复采血时，两后肢交替使用。
（五）猴采血法
与人类的采血法相似，常用采血法有以下几种：
1、毛细血管采血
需血量少时，可在猴拇指或足跟等处采血。方法与人的手指或耳垂处的采血法相同。
2、静脉采血
最宜部位是后肢静脉及颈外静脉。后肢小隐静脉的取血法与狗相似。用颈外静脉采血时，把猴固定在猴台上，侧卧，头部略低于台面，助手固定猴的头部与肩部。先剪去颈部的毛，用碘酒，酒精消毒，即可见位于上颌角与锁骨中点之间的怒张的颈外静脉穿刺取血。也可在肘窝、腕骨、手背及足背选静脉采血。但这些静脉较细、易滑动、穿刺难，血流速度慢。
3、动脉采血
股动脉可触及。取血量多时常被优先选用，手法与狗股动脉采血相似。此外，肱动脉与桡动脉也可用。
（六）小鼠采血法
1、心脏穿刺采血
麻醉动物，将动物仰放，局部酒精消毒。用塑料注射器，从动物的左侧胸部，肋沿下，心尖部向右侧15～30度角刺入心脏，给小负压，小心操作。
最大安全采血量：
小鼠循环血量占体重的6%，或 5～7ml/kg。采血占全血量的10% 不会对机体造成严重的不良影响。3～4周后可以重新采集一次。
如果需要很短时间反复采血，比如每天一次，每次的采血量不应超过全血的1%。
1.8ml×10%=0.18ml(最大安全采血量)
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